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变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和非变性4大主要区别?

  很多聚丙烯酰胺采购商都在询问变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和非变性的有什么区别,是不是变形聚丙烯酰胺凝胶电泳要比非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳效果要好一点,还是非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳要好于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,不管是变性还是非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,今天京华小编就为大家来变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和非变性有什么区别?

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  聚丙烯酰胺凝胶电泳为什么要变性?
  
  变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是根据寡核苷酸的大小来分离,因此可将全长产物与不完整的短分子分开,原理是通过蛋白质或多肽与SDS结合,经热变性和二硫键的还原,形成所带负电荷相对一致的非折叠衍生物,其泳动速度主要由分子量决定。
  
  非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳里面没加变性剂,一般是SDS.非变性胶跑出来的蛋白能保持其活性一般用做功能试验,如EMSA.由于没有变性剂的原因非变性胶电泳时除了与蛋白分子量有关也会受都电荷的影响,因此对蛋白等电点的确定和缓冲液的酸碱性有注意,有时需要倒转电泳时的正负极.从跑的胶来看,变性胶会比较好看,带比较窄,非变性胶跑出来则比较粗糙.
  
  变性的原因:变性聚丙烯酰胺凝胶电泳buffer里面含尿素等变性剂 pcr产物DNA双链会解离成为单链
  
  非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳不会解链,DNA以双链形式电泳
  
  变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和非变性的主要区别有:
  
  1、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白在电泳过程中和电泳后都不会变性,而变性聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白在电泳过程中和电泳后都会变性。
  
  2、在聚丙烯酰胺凝胶的配置过程之中,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳不能加入SDS,而变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的有SDS。
  
  3、非变性聚丙烯酰胺凝胶的不能够加入SDS和巯基乙醇,而变性聚丙烯酰胺凝胶的而可以同时添加SDS和巯基乙醇。
  
  4、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳不能确定双链DNA的大小,而变性聚丙烯酰胺凝胶电泳则可以确定双链DNA的大小。
  

  以上就是京华小编总结关于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和非变性4大主要区别,要细说哪一种比较好,到底是选变性还是非变性聚丙烯酰胺,自己掂量哟。


文章编辑:新乡市京华净水材料有限公司

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